Актуальность

Бруцеллез составляет значительную долю среди инфекционных патологий животных в нашей стране и имеет огромное социально-экономическое значение. Новой стратегией улучшения качества иммунодиагностики бруцеллеза является использование естественной комбинации рекомбинантных антигенов бруцелл для иммуноферментного тестирования вследствие активного проявления ими ключевых свойств и функции, лучшей имитации  нативных аналогов белков. Использование в качестве микс-антигена комбинации рекомбинантных антигенов бруцелл, экспрессирующихся в разные стадии заболевания, усиливает эффект детекции специфических противобруцеллезных антител.

Цель

Стандартизация и валидация иммуноферментной тест-системы на основе комбинации рекомбинантных периплазматических белков бруцелл для совершенствования серологической диагностики бруцеллеза животных

Ожидаемые результаты

Впервые в Республике Казахстан будет стандартизирована и валидирована согласно требованиям МЭБ иммуноферментная тест-система на основе рекомбинантных антигенов бруцелл для серологического мониторинга бруцеллеза животных. Использование комбинации иммунодоминантных рекомбинантных периплазматических белков бруцелл (ВР26 + SOD) позволит значительно повысить чувствительность и специфичность детекции противобруцеллезных антител в сыворотке крови больных бруцеллезом животных, исключить ложноположительные и ложноотрицательные результаты тестирования. Достоверность результатов исследований будет подтверждена статистической обработкой методами корреляционного и регрессионного анализов.

Руководитель проекта

Ескендирова Сауле Зиядиновна, кандидат ветеринарных наук. Индекс Хирша-4 ORCID 0000-0002-9570-7433Research ID 0-2344-2017 Scopus ID 55438123400

Члены исследовательской группы

Булашев Айтбай Кабыкешович, доктор ветеринарных наук, профессор. Индекс Хирша-3 Scopus Author ID: 7801312328 ResearcherID: O-7397-2017 ORCID:0000-0002-8427-509X

Манат Есбол, Ph.D., Индекс Хирша-1, Researcher ID:ABE-8989-2021, Scopus Author ID: 57222332882 ORCID: 0000-0002-7614-9173

Каукабаева Г.К., магистр.

Мухлис Ш.,магистр.

Публикации и охранные документы научного по теме проекта

1. Barshevskaya L., Sotnikov D., Zherdev A., Khassenov B., Baltin K. , Eskendirova S. , Mukanov K. , and Dzantiev B . Triple immunochromatographic system for simultaneous serodiagnosis of bovine brucellosis, tuberculosis and leukemia // Biosensors.- 2019.-V. 9(4).- P.115; doi:10.3390/bios9040115. IF 5,5 / Q1
2. Bulashev A., Akibekov O., Suranshiyev Z., Ingirbay B., Eskendirova S. Serodiagnostic potential of Brucella outer membrane and periplasmic proteins // Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences.- 2019.-V. 43: doi:10.3906/vet-1902-75 . IF 0,5 / Q3
3. Манат Е., Сарина Н.И., Ескендирова С.З. Шустов А.В., Муканов К.К. Рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3) /pET22/SOD продуцирующую Cu/Zn-зависимую супероксиддисмутазу // Патент РК № 30873 от 17.10.2014
4. Манат Е., Сарина Н.И., Ескендирова С.З. Шустов А.В., Муканов К.К..Рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3)/pET22/BP26 — продуцент периплазматического белка бруцелл BP26 // Патент РК № 32105 от 25.09.2015 г.
5. 5.Manat Y, Shustov A. V, Evtehova E, Eskendirova S.  Expression, purification and immunochemical characterization of recombinant OMP28 protein of Brucella species  //Open Veterinary Journal.- 2016.- V.6 (2). -Р.71-77. doi: http://dx.doi.org/10.4314/ovj.v6i1.     IF 1,4 / Q3
6. Manat Y, Shustov A. V, Evtehova E, Eskendirova S. Production, purification and characterization of recombinant Cu/Zn superoxide dismutase of Brucella abortus // Chinese Journal of Animal Infectious Diseases.- 2014.- Vol.22(2).-P. 46-51.
7. Манат Е., Сарина Н.И., Ескендирова С.З. Шустов А.В., Муканов К.К. Применение иммунохроматографической тест-системы на основе рекомбинантного антигена для серологической диагностики бруцеллеза. Биотехнология. Теория и практика.-2016.-№4.-С.51-60
8. Булашев А.,Сыздыкова А.,Сураншиев Ж., Турсунов К., Ескендирова С. Изучение антигенности белков бруцелл в иммуноферментном анализе //«Вестник НГАУ(Новосибирский агроуниверситет)» – 1 (50)/2019 .- С.92-100. doi:10.31677/2072-6724-2019-50-1-92-10
9. Bulashev A.K., Akibekov O., Syzdykova A.,  Suranshiyev Zh., Ingirbay B.  Use of recombinant Brucella outer membrane proteins 19, 25, and 31 for serodiagnosis of bovine brucellosis // Veterinary World. — 2020.-Vol. 13(7). — P.1439-1447; DOI: www.doi.org/10.14202/vetworld.2020.1439-1447
10. BulashevA.K., Ingirbay B.K., Mukantayev K.N., Syzdykova A.S.Evaluation of chimeric proteins for serological diagnosis of brucellosis in cattle // Veterinary World.-2021.-Vol.14(8). — P.2187-2196; doi: www.doi.org/10.14202/vetworld.2021.2187-2196;

Достигнутые результаты

2022 год

Осуществлена препаративная наработка рекомбинантных антигенов бруцелл — периплазматических белков ВР26 и SOD. Проведена оптимизация и стандартизация концентрации иммунокомпонентов и параметров протокола постановки иммуноферментной тест-системы. Проведен сравнительный анализ антигенной эффективности индивидуальных и комбинированных периплазматических белков бруцелл. Осуществлен отбор положительных и отрицательных референтных и контрольных образцов сывороток крови .